錯誤 1：直接使用未經(jīng)過濾的流動相。部分操作人員為節(jié)省時間，將未經(jīng)過 0.22μm（或 0.45μm）濾膜過濾的甲醇、乙腈或緩沖液直接倒入溶劑瓶。流動相中可能含有的微小顆粒（如試劑雜質(zhì)、塵埃）會隨流動相進(jìn)入色譜柱，堵塞柱內(nèi)填料孔隙，導(dǎo)致柱壓驟升、柱效快速下降，甚至造成色譜柱損壞；同時，顆粒還可能污染進(jìn)樣閥與檢測器流通池，影響儀器正常運行。正確做法是：所有流動相（包括水相、有機相、緩沖液）均需通過對應(yīng)孔徑的濾膜過濾，且水相、有機相需使用不同濾膜（水相用親水膜，有機相用疏水膜），避免濾膜溶解污染流動相。

錯誤 2：流動相未脫氣。若直接使用未脫氣的流動相，其中溶解的氧氣、氮氣等氣體在色譜柱中因壓力變化會釋放氣泡，氣泡進(jìn)入檢測器后會導(dǎo)致基線劇烈波動、出現(xiàn)尖銳雜峰，嚴(yán)重時會中斷流動相輸送，造成分析數(shù)據(jù)失真；此外，溶解氧還可能與流動相中的有機相（如甲醇）或樣品發(fā)生反應(yīng)，影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。正確做法是：采用超聲脫氣（一般超聲 15-20 分鐘）、在線脫氣或真空脫氣等方式，尤其在使用緩沖液或混合流動相時，需延長脫氣時間，避免氣泡殘留。

錯誤 1：樣品未過濾或過濾不規(guī)范。若將含有懸浮顆粒、絮狀物的樣品直接進(jìn)樣，顆粒會堵塞進(jìn)樣針、進(jìn)樣閥，甚至隨樣品進(jìn)入色譜柱，與流動相中的雜質(zhì)共同加劇柱污染；同時，顆粒在檢測器中會產(chǎn)生假信號，導(dǎo)致色譜峰形拖尾、基線漂移，無法準(zhǔn)確判斷樣品組分。正確做法是：使用 0.22μm（與流動相濾膜孔徑一致）的針式濾頭對樣品進(jìn)行過濾，過濾時需棄去初始幾滴濾液，避免濾頭污染樣品；對于粘稠度較高的樣品，需先進(jìn)行稀釋或離心處理，再進(jìn)行過濾。

錯誤 2：樣品溶劑與流動相不兼容。部分操作人員為方便，使用與流動相極性差異過大的溶劑溶解樣品（如用純甲醇溶解需用磷酸鹽緩沖液 - 乙腈作為流動相的樣品），會導(dǎo)致樣品進(jìn)入色譜柱后因溶劑與流動相混合不均，出現(xiàn) “溶劑效應(yīng)"—— 表現(xiàn)為色譜峰分裂、峰形不對稱、保留時間漂移，嚴(yán)重時會影響組分分離度，無法準(zhǔn)確定量。正確做法是：選擇與流動相初始比例（或極性相近）的溶劑溶解樣品，若樣品在流動相中溶解度較低，可適當(dāng)提高有機相比例，但需確保溶劑與流動相混合后無分層、無沉淀。

錯誤 1：開機后直接升壓，未進(jìn)行系統(tǒng)排氣。開機后若未先開啟泵進(jìn)行低流速（如 0.2-0.5mL/min）排氣，直接將流速升至分析流速并升壓，會導(dǎo)致系統(tǒng)內(nèi)殘留的氣泡被壓縮在管路或色譜柱中，形成 “氣塞"，造成柱壓異常升高；同時，突然升壓會對色譜柱填料產(chǎn)生沖擊，導(dǎo)致填料顆粒塌陷，縮短色譜柱使用壽命。正確做法是：開機后先將泵流速調(diào)至 0.5mL/min，打開排液閥（或斷開色譜柱入口端），待流出液無氣泡后，關(guān)閉排液閥（或連接色譜柱），再逐步升高流速至分析條件，避免流速驟升驟降。

錯誤 2：分析結(jié)束后未及時沖洗系統(tǒng)與色譜柱。實驗結(jié)束后若直接關(guān)機，流動相中殘留的緩沖液（如磷酸鹽、醋酸鹽）會在色譜柱內(nèi)干燥結(jié)晶，堵塞填料孔隙；同時，緩沖液與有機相混合后若長時間停留，可能產(chǎn)生沉淀，污染進(jìn)樣閥與檢測器流通池；對于反相色譜柱，若未用純有機相（如甲醇、乙腈）封存，柱內(nèi)殘留的水相會導(dǎo)致填料水解，降低柱效。正確做法是：分析結(jié)束后，先使用不含緩沖鹽的流動相（如甲醇 - 水）沖洗系統(tǒng) 20-30 分鐘，再用純有機相沖洗色譜柱 30 分鐘以上（確保柱內(nèi)無緩沖鹽殘留），最后關(guān)閉泵與檢測器，待柱溫降至室溫后關(guān)機。

錯誤 3：檢測器操作不當(dāng)，影響檢測精度。常見錯誤包括：紫外檢測器未進(jìn)行基線校正即開始分析，導(dǎo)致基線漂移影響峰面積積分；熒光檢測器未開啟氙燈預(yù)熱，直接進(jìn)行檢測，導(dǎo)致光源強度不穩(wěn)定，出現(xiàn)熒光信號波動；檢測器流通池污染后未及時清洗，殘留的樣品或流動相在流通池內(nèi)吸附，導(dǎo)致檢測靈敏度下降，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。正確做法是：開機后需對檢測器進(jìn)行基線校正（紫外檢測器需預(yù)熱 30 分鐘以上），熒光檢測器需提前開啟氙燈預(yù)熱 1 小時；實驗結(jié)束后，需用合適的溶劑（如甲醇、乙腈）沖洗流通池，若流通池污染嚴(yán)重，可使用稀硝酸（針對金屬離子污染）或超聲清洗（需拆卸流通池，按儀器說明書操作）。

錯誤 1：長期不更換進(jìn)樣針與密封圈。進(jìn)樣針長期使用后，針尖易磨損或變形，導(dǎo)致進(jìn)樣體積不準(zhǔn)確，出現(xiàn)定量重復(fù)性差；進(jìn)樣閥密封圈長期受流動相腐蝕、樣品摩擦，會出現(xiàn)密封不嚴(yán)，導(dǎo)致流動相泄漏、進(jìn)樣交叉污染（前一樣品殘留影響后一樣品分析）。正確做法是：每使用 500-1000 次進(jìn)樣針后，檢查針尖狀態(tài)，若出現(xiàn)磨損及時更換；進(jìn)樣閥密封圈每使用 3-6 個月（或出現(xiàn)泄漏時）更換，更換時需注意密封圈型號與安裝方向，避免安裝錯誤導(dǎo)致密封失效。

錯誤 2：色譜柱儲存與使用不當(dāng)。將不同類型的色譜柱（如反相柱、正相柱）混合儲存，未標(biāo)注使用記錄，易導(dǎo)致色譜柱誤用（如用反相柱分析正相樣品）；色譜柱長期不用時，未按要求用專用溶劑封存（如正相柱用正己烷 - 異丙醇封存），導(dǎo)致柱內(nèi)填料干裂或受潮；使用時隨意改變色譜柱溫度范圍（如超過色譜柱標(biāo)注的最高溫度），導(dǎo)致填料性能退化，柱效下降。正確做法是：色譜柱儲存時需標(biāo)注型號、使用時間、上次分析樣品類型，按極性或類型分類存放；長期不用時，用對應(yīng)的封存溶劑沖洗后密封兩端，存放于陰涼干燥處；使用時嚴(yán)格遵守色譜柱的溫度、pH 范圍要求，避免超范圍使用。